О методике получения PRP.
Методика получения PRP
-
Взятие крови для проведения PRP -
Вид пробирки с кровью для PRP -
Промежуточный этап центрифугирования
-
Извлечение пробирки
из центрифуги -
Пробирка с обогащенной
тромбоцитарной плазмой PRP -
Введение обогащенной тромбоцитарной
плазмы в коленный сустав
Простая процедура
I. Перед работой с набором YCELLBIO PRP
Характеристика пациентов
- 1) Пациент - мужчина
- У молодых и здоровых мужчин наибольшая концентрация тромбоцитов и факторов роста в крови.
- У мужчин, как правило, слой эритромассы относительно больше, чем у женщин или пациентов с анемией за счет большего размера красных кровяных телец (ККТ).
- 2) Пациент - женщина
- Как правило, количество тромбоцитов меньше, чем у мужчин.
- ККТ женщин по размеру меньше, чем ККТ мужчин.
- 3) Пациент с анемией (вне зависимости от пола)
- У более здоровых мужчин большая концентрация тромбоцитов и факторов роста.
- ККТ мужчин по размеру больше, чем ККТ женщин.
- У молодых и здоровых мужчин наибольшая концентрация тромбоцитов и факторов роста в крови.
- У мужчин, как правило, слой эритромассы относительно больше, чем у женщин или пациентов с анемией за счет большего размера красных кровяных телец (ККТ).
- Как правило, количество тромбоцитов меньше, чем у мужчин.
- ККТ женщин по размеру меньше, чем ККТ мужчин.
- У более здоровых мужчин большая концентрация тромбоцитов и факторов роста.
- ККТ мужчин по размеру больше, чем ККТ женщин.
Богатая тромбоцитами плазма (БоТП) = Platelet Rich Plasma (PRP)
Бедная тромбоцитами плазма (БеТП) = Platelet Poor Plasma (PPP)
Лейкотромбоцитарный слой = Слой PRP / слой PPP (в зависимости от концентрации тромбоцитов)
- У молодых и здоровых мужчин наибольшая концентрация тромбоцитов и факторов роста в крови.
- У мужчин, как правило, слой эритромассы относительно больше, чем у женщин или пациентов с анемией за счет большего размера красных кровяных телец (ККТ).
- 4) Пациент, большой возраст (вне зависимости от пола)
- У более молодых пациентов большая концентрация тромбоцитов и факторов роста в крови.
- ККТ мужчин по размеру больше, чем ККТ женщин.
До забора крови врач должен принять во внимание соответствие состояния здоровья донора определенным нормам.
Памятка пациенту
- Прекратите применение антикоагуляционных и/или антитромботических препаратов (например, аспирина) за 2 недели до забора крови;
- Перед процедурой проконсультируйтесь с врачом, если Вы страдаете заболеваниями крови и/или сердечно – сосудистой системы;
- Предупредите врача, если Вы страдаете от анемии;
- До процедуры воздерживайтесь от курения и употребления алкоголя.
- Перед процедурой включите в Ваш рацион больше фруктов, особенно содержащие витамин С;
- Перед процедурой постарайтесь хорошо отдохнуть и выспаться
- По возможности избегайте стресса;
От состояния пациента напрямую зависит результативность извлечения PRP. В случае, если состояние пациента была неудовлетворительным, возможно нечеткое выделение слоя PRP после центрифугирования.
II. Подготовительный этап
1. Перечень необходимого
- Контейнер YCELLBIO (1 шт.);
- Кровь (15 мл);
- Антикоагулянт (1,5 мл);
- Шприц на 20 см3 (1 шт.);
- Шприц на 5 см3 (1 шт.);
- Шприц на 3 см3 (1 шт.);
- Игла калибра 21G или игла «бабочка» (1 шт.);
- Игла калибра 18G с длиной 40 мм (2 шт.);
- Вата, смоченная в спирте / Пинцет.
2. Особенности контейнера YCELLBIO
От состояния пациента напрямую зависит результативность извлечения PRP. В случае, если состояние пациента была неудовлетворительным, возможно нечеткое выделение слоя PRP после центрифугирования.
- Контейнер YCELLBIO (1 шт.);
- Кровь (15 мл);
- Антикоагулянт (1,5 мл);
- Шприц на 20 см3 (1 шт.);
- Шприц на 5 см3 (1 шт.);
- Шприц на 3 см3 (1 шт.);
- Игла калибра 21G или игла «бабочка» (1 шт.);
- Игла калибра 18G с длиной 40 мм (2 шт.);
- Вата, смоченная в спирте / Пинцет.
3. Какой антикоагулянт использовать
Существует несколько видов антикоагулянтов, применение которых позволяет добиться выделения тромбоцитов и сохранения их свойств
- Рекомендуются к применению:
- ACD-A (раствор цитратного гемоконсерванта с декстрозой);
- Цитрат натрия.
- Не рекомендуются к применению:
- Гепарин : Гепарин препятствует высвобождению факторов роста PRP;
- ЭДТА :ЭДТА способен нанести повреждение мембране тромбоцита.
4. Сколько антикоагулянта необходимо?
1) Заберите шприцом 1,5 мл антикоагулянта;
2) Перед забором крови важно, чтобы внутренняя поверхность цилиндра шприца была обработана антикоагулянтом.
III. Сбор крови
1. Забор крови у пациента
1) Заберите необходимое количество крови;
2) Перемешайте кровь в шприце.
- Перед забором крови необходимо удалить весь воздух из шприца;
- Забор крови после пункции необходимо проводить плавно. Если забор крови в шприц производился слишком резко, это можно повредить клетки крови.
2. Введение крови в контейнер
- 1) Используйте иглу 18G;
- 2) Влейте собранную кровь в контейнер YCELLBIO (под углом 45?).
| Мужчина | Женщина | Анемия | |
| Кровь | 12,5 мл | 13,5 мл | 14 мл |
| Антикоагулянт | 1,5 мл | 1,5 мл | 1,5 мл |
| Всего | 14 мл | 15 мл | 15,5 мл |
1. Метки объема забранной крови;
Если пациент страдает от анемии, следует забрать большее количество крови, поскольку уровень гематокрита у таких пациентов снижен.
2. Закупорка горловины контейнера.
Если во время вливания крови в контейнер произошла закупорка горловины, используйте иглу шприца для расчистки отверстия.
IV. Центрифугирование
1. Условия проведения центрифугирования
| Тип | Цифровая | Не цифровая | |
| Ротор – крестовина (РК) | Угловой ротор (УР) | Угловой ротор (УР) | |
 |
 |
 |
|
| Об. / мин. | 3200~3300 | 3600~3800 | 3400~3600 |
| RCF (ОЦУ) | 1888*g ~ 2008*g | ||
| Время | 6 мин. – 10 мин | ||
Цифровые центрифуги автоматически определяют частоту вращения на основании ОЦУ. Поэтому частота вращения на разных моделях может отличаться от указанных выше при работе в автоматическом режиме.
2. Адаптер центрифуги
Если у Вас центрифуга с таким же типом ячеек, убедитесь, что между контейнером и ротором есть достаточное расстояние. Иначе контейнер может разбиться.
Контейнер следует поместить в адаптер до конца.
Адаптер защищает контейнер и стабилизируют его во время вращения (особенно актуально, если диаметр ячейки центрифуги больше диаметра контейнера).
3. Цель процедуры центрифугирования
Цель центрифугирования – поместить гематокритный слой ниже горловины.
4. Поворотный колпачок
1) Использование поворотного колпачка
2) Исходное положение
Линия 3 соответствует исходному положению колпачка.
3) Ограничительная линия
Если колпачок опущен ниже линии 4, кровь может вытечь во время вращения.
5. Результат центрифугирования
- Завышенный гематокрит означает, что после проведения центрифугирования слой ККТ располагается выше горловины.
- Как правило, возникает при работе с кровью мужчин.
Что делать, если слой ККТ все равно не опустился ниже горловины?
Проведите еще одно центрифугирование с теми же параметрами.
Пониженный гематокрит означает, что слой ККТ располагается значительно ниже горловины после проведения центрифугирования.
Данная ситуация все еще является неплохим результатом, несмотря на нечеткое выделение. Поднимите PRP к уровню метки PRP и извлеките его.
Если поднять и извлечь PRP невозможно из-за того, что колпачок уже повернут на максимум, - воспользуйтесь длинной иглой.
У некоторых пациентов тромбоциты практически отсутствуют. Если после проведения нескольких процедур центрифугирования слой PRP отсутствует, извлеките часть плазмы возле слоя ККТ.
V. Извлечение PRP из контейнера
1. Как извлечь PRP
1) Отрегулируйте высоту слоя PRP при помощи колпачка (напротив метки)
2) Приготовьте 3 см3 шприц с иглой 18G для извлечения слоя PRP;
3) Заберите 1,5 – 2 мл PRP из горловины. Слегка взболтайте плазму иглой, чтобы осевшие тромбоциты поднялись.
4) Заберите остатки PPP при помощи 5 см3 шприца. В дальнейшем PPP можно применять как успокаивающее и смягчающее кожу средство.
2. Оценка количества PRP
Примерно 1/10 от общего объема забранной крови составит извлеченный слой PRP.
| Мужчина | Женщина | Анемия | |
| Объем крови | 12,5 мл | 13,5 мл | 14 мл |
| Объем антикоагулянта | 1,5 мл | 1,5 мл | 1,5 мл |
| Объем PRP PRP / Кровь 1 / 10 |
1,25 мл | 1,35 мл | 1,4 мл |
Как правило, около 0,05 мл PRP остается внутри иглы, которую использовали для извлечения. Этот факт следует учитывать при оценке фактического количества извлекаемого PRP.
| Мужчина | Женщина | Анемия | |
| PRP | 1,25 мл | 1,35 мл | 1,4 мл |
| Потеря | -0,05 мл | -0,05 мл | -0,05 мл |
| Фактический объем PRP | 1,2 мл | 1,3 мл | 1,35 мл |
Павел Жадан
Александр Вайнтруб
Дмитрий Волобуев